Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FB飥#?

細胞分類：
*種：
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
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250克A1 MediumA1培養(yǎng)基

250克Yeast Extract Agar酵母提取物瓊脂

250克Lactose Peptone Broth乳糖蛋白胨肉湯

250克Cary-Blair Transfort MediumCary-Blair氏運送培養(yǎng)基

250克MFC MediumMFC培養(yǎng)基

250克Brilliant Green Lactose Medium亮綠乳糖培養(yǎng)基

250克Lecithin Tween 80 Nutrient Agar吐溫80營養(yǎng)瓊脂

250克Acetamide Agar乙酰胺瓊脂

TCHP  抑癌蛋白TCHP抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCF9/GCF  轉(zhuǎn)錄因子9抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCF7L2  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體   規(guī)格 0.1ml*

TCF3/E2A/E47  轉(zhuǎn)錄因子3抗體（螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47）   規(guī)格 0.2ml*

TCF12/HEB  轉(zhuǎn)錄因子12抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCERG1/CA150  轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體   規(guī)格 0.1ml*

TCEB3/Elongin A  轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體   規(guī)格 0.1m*

TBX-5  轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體   規(guī)格 0.1ml*

TBX3  轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體   規(guī)格 0.2ml*

Tbx21/T-bet  T細胞介導的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體   規(guī)格 0.1ml*

TBX2/T-box2  血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)   規(guī)格 0.2ml*

TBX2/T-box2  新型抑癌基因抗體   規(guī)格 0.2ml*
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3  Cy3標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Bio  標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/APC  APC標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse anti-rabbit IgG ascites  小鼠抗兔IgG腹水   規(guī)格 1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG  小鼠抗兔IgG   規(guī)格 1mg*

Mouse Anti-human IgM/RBITC  羅丹明標記的小鼠抗人IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的小鼠抗人IgM   規(guī)格 0.1ml*
【培養(yǎng)指南】
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-550保存凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
【復蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。