① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人視網(wǎng)膜Muller細胞

英文名稱：Human Retinal Muller Cells

組織來源：視網(wǎng)膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質細胞，大約占視網(wǎng)膜膠質細胞的90%，因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上，Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度，更發(fā)達的內(nèi)質網(wǎng)，細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位，Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的神經(jīng)膠質細胞，不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結構和功能的作用，并調制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動，還能參與多種病理過程，尤其是眼底增殖性病變，如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等，體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

小鼠轉化生長因子-β1   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor -β1   規(guī)格：      英文縮寫：   TGF-β1

小鼠轉化生長因子-β2   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor -β2   規(guī)格：      英文縮寫：   TGF-β2

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-1   英文名稱：   Tissue inhibitors of metalloproteinases 1   規(guī)格：      英文縮寫：   TIMP-1

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-2   英文名稱：   Tissue inhibitors of metalloproteinases 2   規(guī)格：      英文縮寫：   TIMP-2

小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble adhesion molecule (Sam) ELISA Kit 人可溶性粘附分子(Sam)試劑盒

Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit 人鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體1(C-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor1,3-DPG(Human1,3-Disphosphoglycerate,ELISAKit人1,3-二0酸甘油酸

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit小鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD22重組小鼠 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

4(KLK4)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 4 (KLK4)

AGA重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 Protein

CD24 Protein Human 重組人 CD24 蛋白 (Fc 標簽)

RBP4 Protein Canine 重組狗 RBP4 蛋白

4(KLK4)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 4 (KLK4)

CD24 Protein Human 重組人 CD24 蛋白 (Fc 標簽)

CD22重組小鼠 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

RBP4 Protein Canine 重組狗 RBP4 蛋白

AGA重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 Protein

人視網(wǎng)膜Muller細胞大鼠釋放激素受體(GHR)試劑盒 ，英文名： GHR ELISA Kit

Porcine histamine (HIS) ELISA Kit 豬組胺(HIS)試劑盒

ELISA 小鼠腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse BDNF)  進口分裝

CLIAKitforL-LDH(HumanL-LactateDehydrogenase)ELISAKit人L-乳酸脫氫酶

通用型EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitCRP雞C反應蛋白

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用