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產(chǎn)品名稱:重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3(TGF-β3)

產(chǎn)品特點(diǎn):重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3(TGF-β3)的相關(guān)產(chǎn)品:GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 P

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-11-19

訪問次數(shù):445

重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3(TGF-β3)的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:

產(chǎn)品英文名稱:Human TGF-β3 protein

產(chǎn)品中文名稱:重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3(TGF-β3

規(guī)格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號:EY-01X8707
用途:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:

序列:氨基酸序列來源于人源:TGF-β3 蛋白(Ala301-Ser412)表達(dá)的蛋白片段,C-端帶有 6×His 標(biāo)記。

活性:以其抑制IL-4誘導(dǎo)的HT-2細(xì)胞增殖的能力來衡量。這種效應(yīng)的ED50<50 pg/mL。重組人 TGF beta 3 的特異性活性:大于 2 x 10? IU/mg

蛋白長度:該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 13.66 kDa,在還原條件下,蛋白質(zhì)遷移為 13 kDaSDS-PAGE 分析)。

純度:> 98 % ,使用SDS-PAGE動(dòng)?動(dòng)

背景

轉(zhuǎn)化生長因子-β3TGF-beta 3)屬于 TGF-β 超家族,TGF-β3 TGF-β1 TGF-β2 的相似度分別為 86%91%TGF-beta 3 是一種 12.8 kDa 的蛋白質(zhì),含有 412 個(gè)氨基酸,可抑制 DNA 合成,增加細(xì)胞增殖,是心臟形態(tài)發(fā)生過程中 EMT 的重要介質(zhì),并在乳汁淤積時(shí)上調(diào),在乳腺內(nèi)陷過程中誘導(dǎo)乳腺上皮細(xì)胞凋亡。

重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3(TGF-β3)

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟:

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品:


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重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3TGF-β3CD48重組小鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 Protein

Caspase-8 (pro Mch5 0.5mgCaspase-8 (pro Mch5) 半胱蛋白酶8抗原

ENTPD3重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白 Protein

IL16 Protein Human 重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白


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