產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Rat EGF protein

產(chǎn)品中文名稱：重組大鼠表皮生長因子（EGF）

規(guī)格：20 μg/500 μg/100 μg/1 mg

貨號：EY-01X8641
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

標簽:無標簽

表達宿主:大腸桿菌

種屬:大鼠

序列:氨基酸序列來源于： 大鼠 EGF (P07522)(Asn974-Arg1026) 表達的蛋白片段。

活性:通過其在Balb/3T3細胞中誘導增殖的能力來測定。該效應的ED50為0.1098 ng/mL。

蛋白長度：重組大鼠EGF由53個氨基酸組成，預測分子量為6.3 kDa。 在還原條件下，SDS-PAGE中大鼠EGF蛋白的表觀分子量約為6.3 kDa。

純度:≥ 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

采用 LAL 法檢測，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 E動?動

背景

EGF是單通道I型膜蛋白，包含8個低密度脂蛋白受體的B類重復序列:和9個EGF樣結構域。 EGF是一種生長因子，可在體內(nèi)和體外刺激各種表皮和上皮組織以及細胞培養(yǎng)物中某些成纖維細胞的生長。 它可以刺激細胞增殖，分化和存活。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，EGF具有抑制胃液分泌的功能，并在傷口愈合中具有重要作用。 EGF還可以通過一個稱為c-erbB的I類激酶受體發(fā)出信號， 該受體可以與TGF-α和VGF（痘苗病毒生長因子）結合。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥 0.5mgATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原

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CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白

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小鼠白細胞分化抗原30(CD30)ELISA 試劑盒 96T/48T

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質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)毒素凝膠法定量檢測試劑盒20次

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兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子前列腺素E2(PGE2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子前列腺素E1(PGE1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)檢測試劑盒 ，英文名： VEGFR1 ELISA Kit

Mouse chemokine (FK) ELISA Kit 小鼠趨化因子(FK)檢測試劑盒

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CLIAKitforHumanBetaamyloidprecursorprotein,BetaAPPELISAKit人淀粉樣前體蛋白

細胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性檢測試劑盒20次

ELISAKitLDL-IC大鼠低密度脂蛋白免疫復合物

重組大鼠表皮生長因子（EGF）TREM2重組小鼠 TREM2 蛋白 Protein

ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥 0.5mgATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原

KIAA0101重組人 KIAA0101 / p15 / PAF 蛋白 Protein

GAP43 Protein Human 重組人 GAP43 / Neuromodulin 蛋白

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

(四)誘導表達

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。