產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：DiR (DiIC18(7))

產(chǎn)品中文名稱：DiR (DiIC18(7))

規(guī)格：5mg

貨號：EY-01X8572
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

•  λEX/λEm: 748/780 nm(MeOH)。

產(chǎn)品形式深藍(lán)綠色油狀固體

使用中注意事項•  可溶于DMSO、DMF和乙醇。

保存建議:-20℃，避光保存12個月。

運輸條件:藍(lán)冰運輸

背景

DIR是一個親脂性、近紅外熒光花青染料。這個染料常用于標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)膜。兩個18-碳鏈插入到細(xì)胞膜，從而特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色，幾乎不會發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。可以用乙醇配置其儲存液。細(xì)胞染色通常使用的濃度時1-10uM，孵育10-20分鐘的。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒

Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Cheraxquadricarinatuslipovitellin/vitellin,Lv/Vn檢測試劑盒紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白/卵黃0蛋白(Lv/Vn)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

原生質(zhì)酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20次

MouseIgMELISAKit小鼠IgM檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠(FA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠腺苷A1受體(ADORA1)檢測試劑盒 ，英文名： ADORA1 ELISA Kit

Pla vitamin C (VC) ELISA Kit 植物C(VC)檢測試劑盒

Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 小鼠腦素/腦尿肽(BNP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanamyloidbetapeptide1-40,ABeta1-40ELISAKit人β淀粉樣蛋白1-40

細(xì)胞HCK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitE大鼠雌激素

DiR (DiIC18(7))ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。