細胞簡介：

骨的微循環系統是骨微環境的重要組成部分，是骨內物質交換，向骨及骨內其它細胞運送養料和排除廢物的主要場所。通常，微循環血流能滿足骨內各種組織代謝需要，使骨內各種細胞功能得以正常進行。

骨微血管內皮細胞構成了骨內微血管的內襯，其不僅僅是血管與周圍組織之間的屏障，也與其它器官微血管內皮細胞一樣，對局部骨組織代謝具有重要的調控作用，參與了許多骨的病理生理過程，再骨吸收、新骨的形成、血管再生、營養物質轉運、骨內代謝產物輸出及維持骨內微環境平衡方面具有重要作用。

細胞特性：

1）細胞來源于人正常骨組織。

2）細胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。

3）經鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 delf原代 內皮 細胞培養體系 作為該細胞的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠分泌型卷曲相關蛋白4(SFRP4)檢測試劑盒 ，英文名： SFRP4 ELISA Kit

Rat betacellulin (BTC) ELISA Kit 大鼠β細胞素(BTC)檢測試劑盒

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NCAM2重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標簽) Protein

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HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

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植物(ETH)ELISA 試劑盒

Human ai parainfluenza virus IgM aibody (ai-PIV IgM) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIV IgM)檢測試劑盒

PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 豬免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFUELISAKit大鼠αL巖藻糖苷酶

血液唾液酸(SA)比色法定量檢測試劑盒50次

MouseThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)檢測試劑盒

人骨微血管內皮細胞勻漿制作或抽提   Homogenate production or exaction

（皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品）   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)

超氧化物歧化酶（SOD）檢測   Superoxide dismase (SOD) detection

二（MDA）檢測   Malondialdehyde (MDA) detection

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。