細胞簡介：

脂肪間充質干細胞是從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等，由內而外真正的有效抵抗衰老。

脂肪間充質干細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低，同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞，適宜大規模培養，對機體損傷小等優點，而且其來源廣泛，體內儲備量大，適宜自體移植，逐漸成為近年來新的研究熱點之一。

細胞特性：

1）細胞來源于手術取得的正常人脂肪組織。

2)細胞鑒定：CD44熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：成纖維樣細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 Delf原代間充質干細胞培養體系 作為體外培養的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品：

大鼠卵白蛋白(OVA)elisa檢測試劑盒

大鼠β防御素2(DEFB2)elisa檢測試劑盒

小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)elisa檢測試劑盒

人5-核苷酸酶elisa檢測試劑盒

通用型血液對氧磷酶1（PON1）有機磷酸酶活性熒光定量檢測試劑盒

大鼠緩激肽(BK)elisa檢測試劑盒

尿酸含量測試盒

人核糖體合成蛋白NSA2源物(NSA2)elisa分析檢測試劑盒

體外非細胞系統細胞色素P450亞酶2C19（S-MEPHENYTOIN）

鋅指蛋白22抗體 ZNF22

鋅指蛋白620抗體 ZNF620

表皮生長因子受體重組兔單克隆抗體 EGFR

叉頭蛋白O6抗體 FOXO6

DNAJA4蛋白抗體 DNAJA4

DZANK1蛋白抗體 DZANK1

磷酸化非受體型蛋白激酶Tnk1抗體 Phospho-TNK1 (Tyr277)

磷酸化磷脂酰肌醇激酶調節亞單位gamma抗體 phospho-PIK3R3 (Tyr199)

轉運蛋白3抗體 TNPO3

組蛋白賴特異性脫甲基酶1抗體 KDM1/LSD1

核酸內切酶源蛋白MUS81抗體 Mus81

黑色素瘤相關抗原E1抗體 MAGEE1

OS-9蛋白抗體 OS9

PE-Cy5標記人CD25單克隆抗體 human CD25/PE-Cy5

神經節苷酯抗體 ganglioside GM1

生長抑制DNA損傷基因45抗體 GADD45A

熒光細胞流式儀間接檢測試劑盒（含熒光二抗）

大鼠補體蛋白4(C4)elisa生化檢測試劑盒

C4 ELISA Kit

人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)elisa生化檢測試劑盒

人脂肪干細胞COLEC11ELISAKit