HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備 角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基或者 Defined K-SFM  ，添加對(duì)應(yīng)因子，1% P/S 來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

備注:Defined K-SFM培養(yǎng)液包含兩個(gè)組份：基礎(chǔ)培養(yǎng)基1瓶+生長(zhǎng)因子1管

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：培養(yǎng)液92.5%，7.5%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

4）傳代比例：如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是1:2。傳代周期：4-6天，換液頻率：每周 2-3次。

備注：

1. 該細(xì)胞貼壁較慢，為使細(xì)胞貼壁更容易，建議可提前在培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶中鋪0.25%的明膠溶液，并于貼壁24~48小時(shí)后再進(jìn)行后續(xù)操作。

2. 該細(xì)胞生長(zhǎng)不能過(guò)密，請(qǐng)?jiān)谏L(zhǎng)密度80%時(shí)進(jìn)行傳代。

3.使用0.05%消化細(xì)胞，由于Defined K-SFM為無(wú)血清培養(yǎng)液無(wú)法終止消化，所以消化完成后要通過(guò)離心（建議125xg離心5到10分鐘）去除或者用帶10%血清的培養(yǎng)基來(lái)終止消化，再進(jìn)行后續(xù)操作。